植物丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒(TBA 比色法)的檢測(cè)原理

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

動(dòng)物或植物細(xì)胞發(fā)生氧化應(yīng)激(oxidative stress)時(shí)，會(huì)發(fā)生脂質(zhì)氧化。丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一種生物體脂質(zhì)氧化的天然產(chǎn)物，一些脂肪酸氧化后逐漸分解

為一系列包括 MDA 在內(nèi)的復(fù)雜化合物，此時(shí)通過(guò)檢測(cè) MDA 的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平，因此 MDA 的測(cè)定被廣泛用作脂質(zhì)氧化的指標(biāo)。生物體內(nèi)的一些其它生化反應(yīng)也會(huì)產(chǎn)生MDA，例如 thromboxane synthase 也可以催化產(chǎn)生，但只要在測(cè)定時(shí)設(shè)置適當(dāng)對(duì)照即可觀察到脂質(zhì)氧化水平的變化。植物丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒(TBA 比色法)(Plant MDA Assay Kit with TBA)又稱脂質(zhì)氧化(MDA)檢測(cè)試劑盒，是采用一種基于 MDA 和thiobarbituricacid, TBA反應(yīng)產(chǎn)生紅色產(chǎn)物的顯色反應(yīng)，隨后通過(guò)比色法用于對(duì)植物組織(根、莖、葉、種子等)MDA 進(jìn)行檢測(cè)，是專門用于植物脂質(zhì)氧化(lipidperoxidation)水平檢測(cè)的試劑盒，不適用于動(dòng)物組織、細(xì)胞、血液等；丙二醛在較高溫度及酸性環(huán)境中可與 TBA 發(fā)生反應(yīng)，形成紅色的 MDA-TBA 加合物，MDA-TBA 加合物在 532nm 處有最大吸收，該復(fù)合物的吸光系數(shù)為 155mmol/(L.cm)，并且在 600nm 波長(zhǎng)處有最小吸收，植物組織中糖類物質(zhì)對(duì)MDA-TBA 反應(yīng)有干擾，我們總結(jié)出經(jīng)驗(yàn)公式，以消除這一干擾，亦可以通過(guò)比標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較，進(jìn)行含量檢測(cè)。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考)：

1、樣本處理

2、配制 TBA 工作液

3、稀釋標(biāo)準(zhǔn)品

4、樣品測(cè)定

計(jì)算：如果進(jìn)行簡(jiǎn)易快速檢測(cè)，直接以 10μM 標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行計(jì)算，獲得 MDA 的摩爾濃度；

如果采用經(jīng)驗(yàn)公式，無(wú)需制作標(biāo)準(zhǔn)曲線或測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品；如果需要精確計(jì)算，以 MDA 標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，以對(duì)應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算處 MDA 提取液的濃度；對(duì)于固體狀組織，可以通過(guò)單位重量的蛋白含量或組織重量等來(lái)表示最初樣品中的 MDA 含量，例如μmol/mg 蛋白或μmol/mg 組織。

注意事項(xiàng)：

1、 上述低溫試劑避免反復(fù)凍融，以免失效或效率下降。

2、 如果沒(méi)有分光光度計(jì)，也可以使用酶標(biāo)儀測(cè)定，檢測(cè)樣品量會(huì)相應(yīng)增加。

3、 待測(cè)樣品盡量新鮮，提取后應(yīng)盡快檢測(cè)，以免活性下降。

4、 待測(cè) MDA 提取液如不能及時(shí)測(cè)定，應(yīng)置于-20℃保存，4 天內(nèi)穩(wěn)定。

有效期：12 個(gè)月有效。

植物丙二醛(MDA)檢測(cè)試劑盒(TBA 比色法)